2019 年 12 月底，武汉爆发新型冠状病毒（2019-nCoV）感染导致的肺炎，2020年1月22日国家卫生健康委员会发布《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南（第二版）》中指出实验活动暂按照病原微生物危害程度分类中第二类病原微生物进行管理，有要求如下：
1、病毒培养 在病毒的分离、培养、滴定、中和试验、活病毒及其蛋白纯化、病毒冻干以及产生活病毒的重组试验等操作应在具有开展相应活动资质的生物安全三级（Biological Safety Level 3,BSL-3）实验室进行；
2、动物感染实验 指以活病毒感染动物的实验，应在具有开展相应活动资质的动物（Animal）BSL-3（ABSL-3）实验室进行操作。
3、未经培养的感染性材料的操作 未经培养的感染性材料在采用可靠的方法灭活前进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸检测、生化分析等操作，应在生物安全二级（BSL-2）实验室操作，但个人防护装备参照生物安全三级（BSL-3）实验室的防护要求。
WHO 和美国 CDC 等也发布了相关指南，指导实验室检测及临床诊治，指南建议核酸检测在生物安全第二等级（BSL-2）设施中进行。
从目前掌握的新型冠状病毒的生物学性状、传播特性、致病性、临床资料等信息，考虑到新型冠状病毒感染聚集性发病且有重症病例，并有死亡病例的特点，实验活动暂按照病原微生物危害程度分类中第二类病原微生物进行管理，和口蹄疫、高致病性禽流感病毒、艾滋病毒（I型和II型）、SARS冠状病毒等大家常见病毒为同一类，这样就对实验室生物安全方面提出了挑战。
本文将从试验废弃物处理、试验设备和空间消毒灭菌、标本运输安全等三个方面对潜在风险层面进行分析，以供相关专业人士参考。
一、试验废弃物
根据GB19484-2008《实验室安全通用要求》中规定，生物安全三级（BSL-3）实验室在防护区内需设置生物安全型的双扉高压蒸汽灭菌柜，试验过程中产生的固体废弃物和少量液体废物物需经过专用的高压蒸汽灭菌柜灭活后排出。因此，生物安全型的双扉高压蒸汽灭菌柜是生物安全三级（BSL-3）实验室不可或缺的设备，同时生物安全型的双扉高压蒸汽灭菌柜在制造和选型方面有着特殊的要求。
1、生物安全密封方面的要求 生物安全型的双扉高压蒸汽灭菌柜横跨污染区和非污染区，这样就对灭菌柜和墙面的密封提出了较高的要求，正常情况下在装载侧进行生物安全密封，故在设备选型过程中需要注意灭菌柜腔体外侧至设备设备外侧装饰板内侧从上到下、从左到右需要至少用AISI 304不锈钢板满焊。同时在设备外层装饰板与墙壁的密封处需要用不锈钢板进行锚定并用优质硅胶进行密封。特别要注意的是在设备与墙壁密封处不用不锈钢板锚定只是简单的用硅胶进行密封在长时间运行后因硅胶老化发生病毒泄漏，造成生物安全事故。如1967德国马尔堡病毒实验室感染事件、1979年前苏联斯维尔德洛夫斯克炭疽菌泄漏事件、2003年新加坡国立大学实验室SARS感染事件、2004中国大陆中国疾病预防控制中心实验室SARS感染事件等等。
2、进气过滤器方面的要求 按照灭菌设计要求需配置可更换滤芯的不锈钢外壳的空气过滤器。过滤后的空气用于灭菌循环结束后平衡腔体内外压力和对门加压密封，对0.2um过滤器过滤效率至少要到达99.9 % ，同时过滤器需带有批次在线灭菌功能，建议每年更换1次。
3、灭废过滤器 生物安全三级（BSL-3）实验室装载侧位于走廊侧门的污染区，在开门时可能会含有病原微生物的空气进入高压蒸汽灭菌柜腔体，同时被灭菌的废弃物中也会含有病原微生物，在开始灭菌抽真空时腔体内的空气必须经过高效过滤器过滤方可排出，高效过滤器在每个灭菌循环中都应该被灭菌，该过滤器建议每年更换1次。
4、进蒸汽的方式 相较与普通的高压蒸汽灭菌柜而言，生物安全型高压蒸汽灭菌柜进蒸汽的位置有较大的不同。普通的高压蒸汽灭菌柜的蒸汽由蒸气发生器产生纯蒸汽后通过不锈钢管路从腔体的侧面或顶部分布器在腔体内分布，灭菌循环开始后腔体内空气、空气蒸汽混合物通过腔体底部的排水口排出，而生物安全型高压蒸汽灭菌柜的蒸汽则由腔体底部进入腔体，灭菌循环开始后腔体内的空气、空气蒸汽混合物通过灭废过滤器过滤后排出，从而避免开始灭菌抽真空过程中腔体含有致病微生物的空气、空气蒸汽混合物被排出实验室。
5、灭菌冷凝水处理 普通的高压蒸汽灭菌柜开始灭菌循环后产生的冷凝水直接通过排水口排入地漏，而生物安全型高压蒸汽灭菌柜在开始灭菌循环后产生的冷凝水则是会被收集灭菌，待灭菌完成后才会通过地漏排出。
二、试验设备和空间消毒灭菌
生物安全实验室是通过实验室设计建造、实验设备的配置、个人防护装备的使用，通过严格遵守预先制定的安全操作程序(SOP)和管理规范等综合措施，确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害，确保周围环境不受其污染，但往往在实验室中与各种病原微生物相关，所以做好安全防护和环境消毒灭菌是预防的重要手段。
传统的方法多采用甲醛熏蒸和紫外灯照射的方法，由于甲醛具有刺激性气味，而且对眼睛、呼吸道、皮肤具有不良刺激，高浓度溶液可引起皮肤凝固性坏死，为A类致癌物质。在甲醛灭菌后需要进行中和，中和后白色会有结晶物产生，且很难完全清除。紫外灯照射照射方法灭菌因紫外线照射需要直接照射被消毒物体表面或空气才起作用，而对被遮挡的墙壁表面、地面和工作台面等则不起作用。随着大家对环境和人身安全的关注，气化过氧化氢空间灭菌技术越来越受到设备使用的喜爱，它是一种将液态过氧化氢转换成气态过氧化氢的灭菌方法，其主要特点是干燥、作用快速、无毒无残留等优越性。
1、灭菌全过程控制 作用原理是将30%~35%浓度液体过氧化氢通过高温闪蒸板气化成气态过氧化氢，然后输送到实验室空间内，过氧化氢气体进行分子无规则布朗运动对空气和物体表面进行消毒。该技术普遍运用于生物安全实验室。过氧化氢消毒包括准备阶段(预热除湿)、调节阶段(过氧化氢气体快速注入)、灭菌阶段(过氧化氢气体慢速注入以维持其室内浓度)、降解通风4个阶段。
2、闪蒸温度控制 众所周知，35%浓度的液体过氧化氢沸点是108℃，传统的低温闪蒸技术无法实现过氧化氢完全气化，这样就会在灭菌全过程中有高浓度的过氧化氢液体被喷射到设备表面、彩钢板墙面及环氧地坪处，从而造成腐蚀气泡，而这些腐蚀气泡可能会给了气溶胶传播这一类致病微生物隐藏空间，无法运行气化过氧化氢空间灭菌技术进行完全灭菌，从而导致实验室发生感染，比如结核分枝杆菌。
3、数据传输 由于生物安全三级（BSL-3）实验室是密闭的负压实验室，无法像普通实验室一样进行数据的纸质数据的记录和直接传递，目前多采用实验数据记录与传输的计算机网络进行数据的传递，这样就需要对气化过氧化氢空间灭菌设备提出了要求，设备自身需带有存储功能和网络端口。
4、对生物安全实验室环境保持的影响 生物安全三级（BSL-3）实验室正常状态下是负压状态，实验室的气流采用定向流动控制。在气化过氧化氢空间灭菌设备运行过程中实验室内温度、湿度变化均会对实验室负压状态有一定的影响，故在设备运行过程中需要监控设备闪蒸板和房间的温度、房间的湿度都是身份必要的。
5、新型冠状病毒期间要注意的事宜
根据国家卫生健康委员会发布《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南（第二版）》中未经培养的感染性材料的操作可在生物安全二级（BSL-2）实验室进行，实验室定期采用气化过氧化氢空间灭菌设备对实验室空间内、检测设备内外表面潜在病毒进行灭菌是十分必要，特别是肩负保护检测人员安全的生物安全柜因其HEPA过滤器、风道及排风管道更无法使用传统方法灭菌。目前已知的华中科技大学协和医院、武汉市金银潭医院、青岛一附院等医院检验科人员在未接触病人情况下发生感染。
三、标本运输安全
根据国家卫生健康委员会发布《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南（第二版）》中国内运输要求：新型冠状病毒毒株或其他潜在感染性生物材料的运输包装分类属于A类，对应的联合国编号为UN2814，包装符合国际民航组织文件Doc9284《危险品航空安全运输技术细则》的PI602分类包装要求；环境样本属于B类，对应的联合国编号为UN3373，包装符合国际民航组织文件Doc9284《危险品航空安全运输技术细则》的PI650分类包装要求；通过其他交通工具运输的可参照以上标准包装。
新型冠状病毒毒株或其他潜在感染性材料运输应按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》（原卫生部令第45号）办理《准运证书》。
在新型冠状病毒疫情期间，为保护检验人员安全，对用于样本运输的样本转运箱在进入实验室前尽可能采用紫外灯或臭氧传递窗灭菌对样本运转箱外表面进行灭菌，有条件的生物安全三级（BSL-3）实验室也可采用带有集成过氧化氢发生器的传递窗进行灭菌。笔者发现市面也有带过氧化氢接口的生物安全型高压蒸汽灭菌柜，以实现双扉高压蒸汽灭菌柜、过氧化氢传递窗双功能。
