Erbi Breez™微灌流反应器优势
Ø 2ml的工作体积
Ø 高通量的平行反应器（可同时运行4个）
Ø 全自动控制系统：细胞密度（OD）、溶氧(DO)、酸碱度（PH）的光学传感器
Ø 高细胞密度连续流工艺
一．微型反应器2mL与ATF 200mL反应器平行性比较
1.1细胞生长阶段的对比
如下图所示：细胞生长（扩增）阶段（day0-day9），两个反应器具有相同的细胞密度增长趋势和葡萄糖代谢情况，显示出良好的试验平行性
1.2 稳态灌流下的细胞生长
经过前期的验证，两者在细胞生长阶段具有良好的平行性。为了进一步了解稳态灌流下的细胞生长对比情况，直接采用高密度接种。如下图所示：接种密度从30M开始培养，考虑Breez反应器中滤膜有潜在堵塞风险，Breez反应器的目标密度控制为ATF反应器的一半，相应灌流速率控制为一半，细胞比灌流速率CSPR控制在同一水平（15-18 pL/cell/day），显示了系统稳态灌流下的培养稳定性。
1.3细胞生产代谢对比
如上图所示：生长速率变化具有良好的平行趋势，细胞的单克隆抗体的产率表现出良好的均一性。
如上图所示：在单克隆抗体的糖基化亚型及电荷异质性表现上，ATF系统反应器和Erbi breez有着相似的产品质量属性。
二、DoE案例：Simplex-centroid (mixture) design（单纯形重心设计法）
单形格子设计是 Scheffé 提出的一种混料设计，设试验中考察的指标为 y ，那么 y 与 p 个因子 x1,x2,...,xp 的关系可以表示为：y=f(x1,x2,……xp)+ε其中，ε是随机误差，称 y=f(x1,x2,…,xp) 为响应函数，当响应函数中的未知参数用估计值代替后便得到回归方程，也称响应曲面方程。由于 f(x1,x2,...,xp) 形式往往是未知的，通常用 x1,x2,…,xp 的一个 d 次多项式表示，此时一个混料试验由因子数 p 与响应多项式的次数 d 来确定，用 M{p,d} 表示一个混料试验。
该方法是一种效率较高的混料试验统计模型，它能根据试验点和响应值给出响应曲面（模型）。具有较高的精度和可靠性，以及较少的试验量，很适合混料试验设计。
2.1.培养基优化的混料试验设计
构建影响培养基的工艺参数模型，评估Erbi breez的最佳培养环境
如图所示案例：4种培养基，共N1-N18种混合培养策略，p=4阶格子设计
2.2平行试验安排
本试验一共使用8个灌流反应系统，灌流速率为1vvd，每种混合方式培养测试7天（共N18种培养策略），其中C1-C4反应器表现如下图所示：通过OD值显示，本次反应的细胞密度控制在55-60 x 106 cells/mL，每7天更换一次培养基，通过记录cell bleed从而评估培养基表现。
2.3三角坐标图
本实验默认M3的占比25%，从而绘制出其他3种培养基混合的生长速率和乳酸代谢变化的三角坐标图，仅供参考；在实际案例中，可根据三角坐标系在最大值作图，可得自然空间中最大值坐标，最后用编码矩阵转换得真实比例，即，按该比例混合培养基，提供的培养环境最优。
