Countstar细胞分析仪在疫苗生产中的应用

病毒疫苗制备有赖于细胞的培养，细胞生长的好坏直接影响疫苗的质量和产量。疫苗生产的工艺示意图：

疫苗生产中的细胞库包括原始细胞库（PCB）和主细胞库（MCB)和工作细胞库（WBC）。这些细胞库通常使用超低温冰箱或液氮罐保藏种子细胞，一般实验室使用50L的液氮罐，再配置1-2个10L的运输罐。从主细胞库中取一定数量的细胞制备工作细胞库(WCB)。

原始细胞库由一个原始细胞群体发展成传代稳定的细胞群体，或经过克隆培养而形成的均一细胞群体，通过检定证明适用于生物制品生产或检定。在特定条件下，将一定数量、成分均一的细胞悬液，定量均匀分装于安瓶或冻存管，于液氮或-130℃以下冻存，即为原始细胞库，供主细胞库建立使用。

主细胞库取自原始细胞库细胞，通过一定方式进行传代、增殖后均匀混合成一批，定量分装，保存于液氮或-130℃以下。这些细胞必须按其特定的质控要求进行全面检定，应合格。主细胞库用于工作细胞的制备。

工作细胞库由主细胞库细胞传代扩增制成。达到一定代次水平的细胞，合并后制成一批均质细胞悬液，定量分装于安瓶或适宜的细胞冻存管，保存于液氮或-130℃以下备用，即为工作细胞库。

病毒疫苗生产中需要预先准备大量的动物细胞，然后接种疫苗生产用的标准毒种，适当培养若干时间后，收获细胞培养物，分离纯化后的病毒便是病毒疫苗生产使用的直接或间接原料。

Countstar细胞分析仪应用于病毒收获之前的每一流程。细胞库的每次传代,以及在发酵罐内进行细胞扩增时，Countstar细胞分析仪能够帮助确定细胞生长状态,细胞密度和活性,以计算传代比例。在工艺控制中，可根据发酵罐的工作体积，确定合适的细胞密度。如果接种到发酵罐的细胞密度，密度过高，容易导致基质不均匀，细胞生长不同步，凋亡快；密度过低，空间利用率低，细胞生长到一定规模需要更长时间，难以保证细胞代次。所以准确的细胞计数，浓度与活率的监测是保证培养成功的重要指标。

a.长春市某疫苗企业利用荧光染色法对人二倍体细胞进行检测，数据如下：

b.沈阳某疫苗企业对生产用Vero细胞浓度与活率稳定性检测

Countstar Rigel计算的细胞活率CV值为0.23%，总细胞浓度CV值为2.32%，活细胞浓度CV值为2.14%，均在误差范围5%以下。

c.吉林某疫苗企业检测200L发酵罐 sf9细胞样本图片

以上案例均是疫苗生产企业的真实数据反馈，在疫苗的生产过程中，Countstar Rigel细胞分析仪具有很好的稳定性和重复性；运用图像法检测，智能图像分析，有图像有数据，方便直观；更拥有多级用户管理权限，符合GMP要求及FDA 21CFR Part11，确保数据的安全性、可追溯性，达到对疫苗的质量控制。