细胞计数是细胞培养过程中,了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度、数量以及了解细胞存活率和增殖度等最基础的实验过程。早前已经介绍过不同类型的细胞最适用的计数方法,本期为大家介绍我们Countstrar家族新成员Mira系列细胞计数仪,带大家走进Countstar Mira和细胞计数的二三事。
Mira跟我们之前Countstar细胞计数仪成员对比有哪些特色呢?
本篇主要展示的是明场的“变倍”技术。Mira在明场计数上增加了我们独创的“变倍”技术,分别为5倍、6.6倍、8倍的放大倍数,用于捕获不同粒径大小细胞的清晰图像,可以根据细胞粒径的大小以及期望细胞成像效果选择理想的放大倍数进行图像计数,下图1为T细胞和小球藻分别在不同放大倍数下检测的原始图片。我们都知道明场细胞计数主要是根据细胞中心透光度辨别细胞活似,细胞成像图片越清晰透光度越明显,活死判断更精准,实现一台仪器同时满足大细胞小细胞活率的准确计数。
图1、细胞在不同放大倍数下细胞图像及推荐使用表
那么不同放大倍数下,Mira检测结果如何呢?下面数据均是以小细胞T细胞为例,进行数据对比。具体方案是采用相同高浓度的细胞样本通过梯度稀释后,对比Mira 的不同放大倍数条件下,采用台盼蓝染色方法检测对比其结果偏差。如下图2,细胞总浓度、活细胞浓度、活率、直径等在不同放大倍数下检测结果偏差均小于10%。
图2、分别是不同放大倍数检测梯度稀释样本的偏差
不同放大倍数条件下,Mira检测T细胞的线性梯度R^2可达0.999x,如下图3均可得到很好的线性梯度。
图3、不同放大倍数检测的样本梯度线性
跟大家公认的Countstar“机皇”Rigel系列对比,荧光场AO/PI检测结果有何差异呢?具体方案和台盼蓝检测方法一致,相同高浓度的细胞样本通过梯度稀释后,同一个样本分别采用Mira FL和Rigel荧光场AO/PI方法检测对比结果,下图4是Mira和Rigel荧光场准确性对比,如下图4数据,浓度和活率两台仪器检测偏差均在10%以内。
图4、Mira FL与Rigel荧光场AO/PI线性梯度数据对比
如下图5两台仪器检测线性梯度R^2为0.99XX。
图5、Mira FL和Rigel S2荧光场AO/PI线性梯度
Mira保证原有的准确性和稳定性,下图6 Mira与Rigel S2荧光场AO/PI稳定性对比,两台仪器检测相同样品复孔间的偏差均小于7%。,说明Mira检测结果和Countstar“机皇”Rigel准确性、稳定性一致。
图6、Mira 与Rigel S2荧光场AO/PI复孔偏差